發(fā)光微生物指自然界存在、細胞內具有生物發(fā)光代謝系統(tǒng)的原核和真核微生物,近來還包括導入發(fā)光基因而使原本不發(fā)光的微生物具備發(fā)光特性的基因工程發(fā)光微生物。發(fā)光微生物毒性測試中應用多的是明亮發(fā)光桿菌,可以檢測各種水體中的有毒物質,對于氣體中可溶性有毒物質,可通過把它吸收、溶解在溶液中,然后觀察其對發(fā)光細菌的影響。
正常生理狀況下,在氧氣與細菌熒光素酶的參與下,細胞可發(fā)出波長為420~670nm的可見光。如果有有毒物質存在,會抑制酶的活性,使發(fā)光量降低,其減弱的程度與毒物的毒性大小和濃度成負相關,因而可以根據(jù)發(fā)光菌發(fā)光強度判斷毒物毒性大小,用發(fā)光強度表征毒物所在環(huán)境的急性毒性。
以明亮發(fā)光桿菌為生物識別元件,以硅光電二極管作為細胞光信號和電信號轉換的敏感元件,構建了細菌發(fā)光傳感器,分別對苯酚、樂guo、乙醛、Hg+、Cu2+、Zn2+等污染物急性毒性進行快速檢測研究,同時和哺乳動物毒性實驗結果做對比。毒性測試結果表明,在pH=7.0,溫度20℃,3.0%NaCI底液條件下,固定化菌膜發(fā)光強度達2~4nw,穩(wěn)定發(fā)光時間60~80min,毒性測試結果的EC50值與哺乳動物毒性試驗的LD50具有良好的相關性,相關系數(shù)r=0.95。
采用光纖探頭結構、以明亮發(fā)光桿菌作為指示物制作了光纖式發(fā)光菌傳感器,以Zn2+為測試對象,實驗結果表明,Zn2+的EC50大約為5.06mg/L,檢測范圍為10ppb~200ppm,與采用國標推薦的方法測得的結果有很好的一致性。